डीटीपी वैक्सीन की उत्पादन प्रक्रिया में अल्ट्राफिल्ट्रेशन का अनुप्रयोग

का आवेदनUमें ltrafiltrationPउत्पादनPकी प्रक्रियाडीटीपी Vaccine

 

1. डीटीपी वैक्सीन

पर्टुसिस, जिसे आमतौर पर काली खांसी के रूप में जाना जाता है, बोर्डेटेला पर्टुसिस के कारण होने वाला एक तीव्र श्वसन संक्रामक रोग है, जो मुख्य रूप से शिशुओं और छोटे बच्चों को प्रभावित करता है। यह श्वसन बूंदों के माध्यम से फैलता है और इसकी ऊष्मायन अवधि 7 से 10 दिनों की होती है। रोगी में खांसी सहित बलगम जमा होने के लक्षण विकसित होंगे। डिप्थीरिया एक तीव्र श्वसन पथ का संक्रमण है जो कोरिनेबैक्टीरियम डिप्थीरिया के कारण होता है। बैक्टीरिया नाक के म्यूकोसा या गले पर आक्रमण करते हैं, बढ़ते हैं, एक्सोटॉक्सिन का उत्पादन करते हैं और स्थानीय सूजन और ऊतक परिगलन का कारण बनते हैं। क्लोस्ट्रीडियम टेटानी के कारण होने वाला टेटनस, त्वचा या श्लेष्मा झिल्ली के घावों के माध्यम से मानव शरीर में प्रवेश करता है। यह अवायवीय स्थितियों में पनपता है और विषाक्त पदार्थों का उत्पादन करता है, जिससे ऐंठनयुक्त मांसपेशी संकुचन शुरू हो जाता है।

डीटीपी वैक्सीन एक संयोजन टीका है जिसमें बोर्डेटेला पर्टुसिस, डिप्थीरिया टॉक्सिन और टेटनस टॉक्सिन के प्रभावी घटक कुछ निश्चित अनुपात में मिश्रित होते हैं और एल्यूमीनियम हाइड्रॉक्साइड सहायक पर सोख लिए जाते हैं। इसका उपयोग तीन बीमारियों को रोकने के लिए किया जाता है: पर्टुसिस, डिप्थीरिया और टेटनस।

 

2. डीटीपी वैक्सीन की उत्पादन प्रक्रिया

डीटीपी वैक्सीन आमतौर पर एक निष्क्रिय टीका है। डीटीपी वैक्सीन की तैयारी मुख्य रूप से सुरक्षा कारणों से निष्क्रिय वैक्सीन उत्पादन प्रक्रिया का पालन करती है। वर्तमान में, चीन में डीटीपी टीकों की उत्पादन प्रक्रिया काफी हद तक 1970 और 1980 के दशक की प्रौद्योगिकी पर आधारित है। हालांकि, पूरी प्रक्रिया के दौरान, डायलिसिस चरणों में कई पारंपरिक निस्पंदन चरण शामिल थे, जो उत्पाद की समग्र उत्पादन प्रक्रिया को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करते थे। खुले चैनलों के साथ स्पर्शरेखीय प्रवाह झिल्ली निस्पंदन उत्पाद जैविक उत्पादों के डाउनस्ट्रीम पृथक्करण में लाभ प्रदान करते हैं, जैसे कम कतरनी बल और उच्च पुनर्प्राप्ति दर। वे विशेष रूप से उच्च सांद्रता, उच्च चिपचिपाहट और उच्च कण सामग्री वाले नमूनों को अलग करने के लिए उपयुक्त हैं, जो उन्हें डीटीपी टीकों की उत्पादन प्रक्रिया के लिए उपयुक्त बनाते हैं।

3. सेल-फ्री डीटीपी कंबाइंड वैक्सीन एंटीजन लिक्विड की शुद्धि प्रक्रिया में हॉलो फाइबर अल्ट्राफिल्ट्रेशन टेक्नोलॉजी का अनुप्रयोग

(1)सामग्री और विधियाँ

①नमूना

विसंदूषित और परिष्कृत कोशिका-मुक्त डीटीपी एंटीजन समाधान (इसके बाद इसे विसंदूषित एंटीजन समाधान के रूप में संदर्भित किया जाएगा)।

②मुख्य अभिकर्मक और उपकरण

इंजेक्शन-ग्रेड पानी; सोडियम क्लोराइड (फार्मास्युटिकल ग्रेड); डायलिसिस बैग; 10kDa खोखला फाइबर; पेरिस्टाल्टिक पम्प।

③सेल-फ्री डीटीपी एंटीजन लिक्विड का अल्ट्राफिल्ट्रेशन और शुद्धिकरण

सबसे पहले, 10kDa खोखले फाइबर का उपयोग करके प्रारंभिक मात्रा को लगभग 5- गुना करने के लिए विसंदूषित एंटीजन समाधान को केंद्रित करें। इसके बाद, छानने और धोने की प्रक्रिया शुरू करें। इसके बाद, जब छानने की मात्रा प्रारंभिक मात्रा से लगभग 4 से 5 गुना तक पहुंच जाए तो छानना बंद कर दें। अंत में, पूरे सिस्टम को धो लें और फिजियोलॉजिकल सेलाइन की 1-गुना मात्रा का उपयोग करके निस्पंद को पुनः प्राप्त करें।

④सेल-फ्री डीटीपी एंटीजन लिक्विड का डायलिसिस और शुद्धिकरण

कीटाणुरहित एंटीजन घोल को सड़न रोकने योग्य तरीके से डायलिसिस बैग में पैक करें और इसे 0.85% बाँझ सोडियम क्लोराइड घोल में डुबोएं और फिर 2-8 डिग्री पर डायलिसिस करें।

⑤शुद्ध तरल पदार्थ की पहचान

अल्ट्राफिल्ट्रेशन और डायलिसिस-पुनर्प्राप्त तरल नमूनों को आनुपातिक रूप से पूर्व-शुद्धिकरण मात्रा में पुनर्स्थापित करें। नियंत्रण के रूप में विसंदूषित एंटीजन समाधान का उपयोग करें और 12% एसडीएस-पेज का उपयोग करके नमूनों की शुद्धता का विश्लेषण करें। समाधानों में ठोस सामग्री को मापें और नमूनों को 15 मिनट के लिए 10,{5}} आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज करने के बाद पुनर्प्राप्ति दर की गणना करें।

परिणाम

①खोखले फाइबर अल्ट्राफिल्ट्रेशन एकाग्रता और धुलाई

अल्ट्राफिल्ट्रेशन सांद्रण प्रक्रिया के दौरान, 70 मिनट के भीतर 4,800 एमएल फिल्ट्रेट प्राप्त होता है, जिसके परिणामस्वरूप सांद्रण 5-गुना हो जाता है। निस्पंदन दर में लगातार गिरावट आ रही है, औसत निस्पंदन दर 42 एलएमएच (69.6 एमएल/मिनट) है। धोने की प्रक्रिया के दौरान, 90 मिनट के भीतर 5,300 एमएल निस्पंदन प्राप्त होता है, जिसके परिणामस्वरूप 4. गुना धुलाई होती है, और निस्पंदन दर में लगातार गिरावट आती है, औसत निस्पंदन दर 36 एलएमएच (59.5 एमएल/मिनट) होती है। अंत में, पूरे सिस्टम को 1,200 एमएल फिजियोलॉजिकल सलाइन से धोएं, और कुल्ला समाधान को पिछले वॉश समाधान (1,200 एमएल) के साथ मिलाएं। तरल का अंतिम सांद्रण कारक 2.5-गुना है। अल्ट्राफिल्ट्रेशन की तुलना में, डायलिसिस के लिए डायलिसिस को पांच बार बदलने की आवश्यकता होती है और इसमें लगभग 6 दिन लगते हैं।

②शुद्ध तरल पदार्थ की पहचान

एसडीएस-पेज विश्लेषण से पता चला कि अल्ट्राफिल्ट्रेशन और डायलिसिस दोनों तरीकों से शुद्ध किए गए सेल-मुक्त डीटीपी वैक्सीन एंटीजन तरल की शुद्धता अपेक्षाकृत अपरिवर्तित रहती है, जैसा कि नीचे दिए गए चित्र में दिखाया गया है। अल्ट्राफिल्ट्रेशन शुद्धि की पुनर्प्राप्ति दर डायलिसिस शुद्धि की तुलना में थोड़ी कम है, जैसा कि नीचे दी गई तालिका में दर्शाया गया है।

नमूना	यथार्थ सामग्री(%)	वसूली दर(%)
विसंदूषित प्रतिजन समाधान	0.872	/
अल्ट्राफिल्ट्रेशन-पुनर्प्राप्त तरल (कम)	0.803	92.1
डायलिसिस से प्राप्त तरल (कम)	0.813	93.2

 

निष्कर्ष

खोखले फाइबर अल्ट्राफिल्ट्रेशन एक झिल्ली पृथक्करण तकनीक है जिसका व्यापक रूप से बड़े आणविक पदार्थों के पृथक्करण, एकाग्रता और शुद्धिकरण के लिए भोजन, किण्वन, फार्मास्यूटिकल्स, पर्यावरण संरक्षण और रासायनिक इंजीनियरिंग जैसे उद्योगों में उपयोग किया जाता है। इस प्रयोग में, विसंदूषित कोशिका-मुक्त डीटीपी एंटीजन समाधान को शुद्ध करने के लिए खोखले फाइबर अल्ट्राफिल्ट्रेशन तकनीक को नियोजित किया गया था। प्रयोगकर्ता ने शुद्धिकरण दक्षता और पुनर्प्राप्ति दर के संदर्भ में पारंपरिक डायलिसिस की तुलना की। परिणामों से पता चला कि अल्ट्राफिल्ट्रेशन में डिटॉक्सिफाइंग एजेंटों और पिगमेंट को हटाने में उच्च दक्षता थी (डायलिसिस के लिए {{2%) दिनों की तुलना में 3 घंटे के भीतर प्राप्त किया जा सकता था) और रिकवरी दर भी अधिक थी। इनसे पता चलता है कि सेल-मुक्त डीटीपी वैक्सीन एंटीजन तरल के अल्ट्राफिल्ट्रेशन शुद्धिकरण के लिए खोखले फाइबर का अनुप्रयोग संभव है। यह मौजूदा डायलिसिस प्रक्रियाओं को प्रतिस्थापित कर सकता है।